توضیحات
Red Blood Cell Lysis Buffer چیست؟
Red Blood Cell Lysis Buffer یا RBC Lysis Buffer محلولی است که برای لیز کردن گلبولهای قرمز و حذف آنها از نمونههای خونی یا سوسپانسیونهای سلولی استفاده میشود.
در بسیاری از پروتکلهای آزمایشگاهی، پس از لیز گلبولهای قرمز، سلولهای هستهدار مانند لکوسیتها در نمونه باقی میمانند و میتوان آنها را برای مراحل بعدی مانند رنگآمیزی، فلوسایتومتری یا استخراج اسیدهای نوکلئیک آماده کرد.
به همین دلیل، RBC Lysis Buffer بیشتر از آنکه یک «ماده شیمیایی منفرد» باشد، یک معرف آماده برای آمادهسازی نمونههای سلولی محسوب میشود.
RBC Lysis Buffer چگونه عمل میکند؟
مکانیسم RBC Lysis Buffer به فرمولاسیون محصول وابسته است، اما بسیاری از بافرهای رایج از آمونیوم کلرید (NH₄Cl) بهعنوان جزء اصلی استفاده میکنند.
آمونیوم کلرید در محیط لیزکننده باعث ایجاد شرایط اسمزی و یونی میشود که به تخریب گلبولهای قرمز کمک میکند. در بسیاری از فرمولها، موادی مانند سدیم بیکربنات و EDTA نیز در تنظیم شرایط محلول یا عملکرد فرمولاسیون نقش دارند.
هدف از طراحی این بافر، ایجاد لیز مؤثر گلبولهای قرمز با حداقل آسیب به سلولهای هستهدار موردنظر است. منابع تجاری و پروتکلهای آزمایشگاهی این ویژگی را برای RBC Lysis Buffer گزارش کردهاند.
کاربردهای Red Blood Cell Lysis Buffer
RBC Lysis Buffer در آزمایشگاههای زیستشناسی سلولی، ایمونولوژی، هماتولوژی تحقیقاتی و زیستمولکولی کاربرد دارد.
مهمترین کاربردهای آن عبارتاند از:
- حذف گلبولهای قرمز از نمونه خون
- آمادهسازی نمونه برای Flow Cytometry
- آمادهسازی لکوسیتها برای آنالیز سلولی
- آمادهسازی نمونه برای استخراج DNA
- آمادهسازی نمونه برای استخراج RNA
- آمادهسازی سلولهای تکسلولی
- حذف RBC از سوسپانسیونهای سلولی با منشأ بافتی
- آمادهسازی نمونه برای رنگآمیزی سلولی و ایمونوفلورسانس
شرکتهای تخصصی مانند Abcam، Roche و Proteintech نیز کاربرد RBC Lysis Buffer را برای حذف گلبولهای قرمز و آمادهسازی سلولهای سفید برای کاربردهای پاییندستی گزارش کردهاند.
RBC Lysis Buffer در Flow Cytometry چه کاربردی دارد؟
یکی از مهمترین کاربردهای RBC Lysis Buffer آمادهسازی نمونه خون برای Flow Cytometry است.
وجود تعداد زیاد گلبولهای قرمز در نمونه میتواند آمادهسازی و تحلیل سلولهای موردنظر مانند لکوسیتها را دشوار کند. بنابراین در بسیاری از پروتکلها ابتدا RBCها حذف میشوند و سپس سلولهای هستهدار برای رنگآمیزی با آنتیبادیها و آنالیز فلوسایتومتری آماده میشوند.
Thermo Fisher نیز RBC Lysis Buffer را برای لیز اریتروسیتها در سوسپانسیونهای تکسلولی خون محیطی و برخی نمونههای بافتی معرفی میکند و به حداقل اثر آن بر لکوسیتها اشاره دارد.
RBC Lysis Buffer در استخراج DNA و RNA چه کاربردی دارد؟
یکی دیگر از کاربردهای مهم این بافر، پیشپردازش نمونه قبل از استخراج DNA یا RNA است.
در نمونههای خون کامل، مقدار زیاد گلبول قرمز میتواند ترکیب نمونه را تحت تأثیر قرار دهد. با حذف RBCها، سلولهای موردنظر مانند لکوسیتها میتوانند برای مراحل بعدی استخراج اسیدهای نوکلئیک آماده شوند.
Roche کاربرد Red Blood Cell Lysis Buffer را برای جداسازی DNA و RNA از خون کامل گزارش کرده است.
مطالعات منتشرشده نیز از بافرهای لیز RBC مبتنی بر آمونیوم کلرید برای حذف گلبولهای قرمز قبل از استخراج DNA استفاده کردهاند.
آیا RBC Lysis Buffer فقط برای خون استفاده میشود؟
خیر. کاربرد RBC Lysis Buffer میتواند به نمونههای مختلف سلولی که دارای مقدار قابلتوجهی گلبول قرمز هستند گسترش پیدا کند.
برای مثال، در برخی پروتکلها از RBC Lysis Buffer برای آمادهسازی نمونههای حاصل از:
- مغز استخوان
- طحال
- بافتهای مختلف
- خون محیطی
- سوسپانسیونهای سلولی
استفاده میشود.
با این حال، مناسب بودن یک محصول برای گونه جانوری یا نوع نمونه خاص باید بر اساس دیتاشیت همان محصول بررسی شود.
ترکیبات RBC Lysis Buffer چیست؟
RBC Lysis Buffer یک فرمول ثابت و جهانی ندارد و ترکیب آن به محصول و کاربرد موردنظر بستگی دارد.
در بسیاری از فرمولهای آزمایشگاهی، ترکیبات زیر دیده میشوند:
| ترکیب | نقش کلی |
|---|---|
| Ammonium Chloride (NH₄Cl) | جزء اصلی بسیاری از فرمولهای لیز RBC |
| Sodium Bicarbonate (NaHCO₃) | تنظیم شرایط یونی و pH در برخی فرمولها |
| EDTA | عامل کمپلکسکننده یونهای فلزی در برخی فرمولاسیونها |
| Water | حلال |
برای نمونه، یک پروتکل دانشگاهی RBC Lysis Buffer را با آمونیوم کلرید، سدیم بیکربنات و EDTA تهیه میکند؛ پروتکلهای منتشرشده دیگر نیز ترکیبات مشابهی با غلظتهای متفاوت گزارش کردهاند.
این جدول، فرمول عمومی/نمونهای است و نباید بهعنوان فرمول قطعی محصول هیربد شیمی آریا منتشر شود مگر اینکه SDS یا دیتاشیت همین محصول آن را تأیید کند.
تفاوت RBC Lysis Buffer با Lysis Buffer سلولی چیست؟
این دو اصطلاح الزاماً به یک محصول اشاره نمیکنند.
RBC Lysis Buffer بهطور اختصاصی برای لیز و حذف گلبولهای قرمز طراحی میشود، در حالی که اصطلاح عمومی Cell Lysis Buffer میتواند به طیف وسیعی از بافرهایی اشاره کند که برای شکستن سلولها و آزادسازی محتویات داخل سلولی استفاده میشوند.
برای مثال، برخی Cell Lysis Bufferها برای استخراج پروتئین طراحی شدهاند و ممکن است حاوی detergentهایی مانند Triton X-100 یا SDS باشند؛ در مقابل، RBC Lysis Buffer معمولاً با هدف حذف RBCها و حفظ سلولهای هستهدار موردنظر طراحی میشود.
بنابراین این دو محصول را نباید صرفاً بر اساس واژه «Lysis» جایگزین یکدیگر دانست.
تفاوت RBC Lysis Buffer با ACK Lysis Buffer چیست؟
ACK Lysis Buffer نامی است که برای یکی از فرمولهای متداول لیز گلبول قرمز استفاده میشود. ACK معمولاً به Ammonium-Chloride-Potassium اشاره دارد و فرمولهای آن بر پایه آمونیوم کلرید هستند.
با این حال، همه محصولات تجاری با عنوان RBC Lysis Buffer الزاماً یک فرمول یا ترکیب دقیق ACK ندارند.
به همین دلیل، برای تشخیص اینکه یک محصول مشخص معادل ACK Buffer است یا خیر، باید ترکیبات و مشخصات فنی همان محصول بررسی شود.
در منابع آزمایشگاهی، فرمولهای ACK/RBC lysis مبتنی بر آمونیوم کلرید، بیکربنات و EDTA گزارش شدهاند.
RBC Lysis Buffer برای چه آزمایشهایی استفاده میشود؟
کاربرد بافر به پروتکل آزمایش بستگی دارد، اما از آن در مراحل آمادهسازی نمونه برای موارد زیر استفاده میشود:
- Flow Cytometry
- Immunofluorescence
- Leukocyte isolation
- DNA extraction
- RNA extraction
- Cell culture preparation
- بررسی سلولهای سفید خون
- برخی مطالعات سلولی و ایمنی
برای نمونه، Proteintech کاربرد RBC Lysis Buffer را پس از رنگآمیزی خون کامل برای Flow Cytometry و همچنین در برخی آمادهسازیهای سلولی گزارش میکند.
هنگام خرید RBC Lysis Buffer به چه نکاتی توجه کنیم؟
برای انتخاب RBC Lysis Buffer مناسب، فقط نام محصول کافی نیست.
موارد زیر را بررسی کنید:
نوع نمونه
مشخص کنید نمونه مربوط به:
- خون انسان
- خون موش
- خون رت
- مغز استخوان
- طحال
- یا بافت دیگری
است.
برخی محصولات فقط برای گونه یا نمونه خاصی اعتبارسنجی شدهاند. برای مثال، Roche محصول مشخص خود را برای خون کامل انسان معرفی میکند، در حالی که محصولات دیگری برای موش یا چند گونه عرضه میشوند.
غلظت
مشخص کنید محصول:
- Ready-to-use / 1X
- یا Concentrated / 10X
است.
محصولات تجاری RBC Lysis Buffer هم بهصورت 1X و هم 10X عرضه میشوند.
ترکیب
در کاربردهای حساس، ترکیب و pH بافر باید با پروتکل آزمایش سازگار باشد.
هدف آزمایش
اگر بافر برای Flow Cytometry، استخراج DNA/RNA یا کشت سلولی استفاده میشود، مشخصات محصول باید با کاربرد نهایی مطابقت داشته باشد.
مستندات
در صورت نیاز، SDS، COA، دیتاشیت و دستورالعمل استفاده محصول را از تأمینکننده دریافت کنید.
1X و 10X در RBC Lysis Buffer چه تفاوتی دارند؟
محلول 1X معمولاً غلظت کاری مورد استفاده در آزمایش است، در حالی که 10X یک محلول غلیظ است که باید قبل از مصرف مطابق دستورالعمل سازنده رقیق شود.
برای مثال، در محصولات 10X، نسبت رایج رقیقسازی میتواند یک قسمت محلول 10X به 9 قسمت آب باشد تا محلول 1X به دست آید؛ با این حال، نسبت دقیق باید همیشه طبق دستورالعمل همان محصول انجام شود.
بنابراین قبل از استفاده، مشخص کنید محصول خریداریشده 1X یا 10X است.
آیا RBC Lysis Buffer سلولهای سفید را از بین میبرد؟
هدف از بسیاری از فرمولهای RBC Lysis Buffer این است که گلبولهای قرمز را بهصورت مؤثر لیز کنند و در عین حال اثر محدودی بر سلولهای هستهدار داشته باشند.
با این حال، نتیجه به نوع بافر، غلظت، زمان تماس، دما، نوع نمونه و پروتکل آزمایش بستگی دارد. افزایش بیش از حد زمان یا استفاده نادرست از بافر میتواند بر کیفیت سلولهای موردنظر اثر بگذارد.
به همین دلیل، دستورالعمل محصول و پروتکل آزمایش باید مبنا قرار گیرد.
خرید Red Blood Cell Lysis Buffer از هیربد شیمی آریا
Red Blood Cell Lysis Buffer یک معرف تخصصی برای آمادهسازی نمونههای سلولی و حذف گلبولهای قرمز است و میتواند در آزمایشگاههای زیستشناسی سلولی، تحقیقات مولکولی و مطالعات مرتبط با خون مورد استفاده قرار گیرد.
اگر برای Flow Cytometry، استخراج DNA/RNA یا آمادهسازی نمونههای سلولی به RBC Lysis Buffer نیاز دارید، پیش از خرید مشخصات فنی محصول را با نیاز آزمایش خود تطبیق دهید.
برای دریافت اطلاعات مربوط به قیمت، موجودی، حجم، غلظت، نوع محصول و مستندات فنی با کارشناسان فروش هیربد شیمی آریا تماس بگیرید.
برای استعلام قیمت و مشخصات Red Blood Cell Lysis Buffer با کارشناسان فروش هیربد شیمی آریا تماس بگیرید.

نقد و بررسیها
هنوز بررسیای ثبت نشده است.