توضیحات
RPMI-1640 چیست؟
RPMI-1640 یک Cell Culture Medium چندجزئی است که برای حمایت از رشد و نگهداری سلول‌های پستانداران طراحی شده است.
این محیط در ابتدا برای کشت سلول‌های انسانی لوسمیک توسعه داده شد و بعدها استفاده از آن به طیف گسترده‌ای از سلول‌های پستانداران گسترش یافت. امروزه RPMI-1640 در مطالعات مربوط به سلول‌های ایمنی، سلول‌های سرطانی و بسیاری از پروژه‌های تحقیقاتی کشت سلولی استفاده می‌شود.
برخلاف یک ماده شیمیایی ساده، RPMI-1640 از مجموعه‌ای از ترکیبات مختلف تشکیل شده است؛ به همین دلیل فرمول شیمیایی واحد یا یک CAS مستقل مانند مواد شیمیایی خالص ندارد.
ترکیبات محیط کشت RPMI-1640
ترکیب دقیق RPMI-1640 به نوع و فرمولاسیون تولیدکننده بستگی دارد. به‌طور کلی، این محیط شامل گروه‌های زیر است:
- آمینواسیدها
- ویتامین‌ها
- نمک‌های معدنی
- گلوکز
- ترکیبات تنظیم‌کننده pH
- ترکیبات مورد نیاز برای متابولیسم سلولی
در برخی فرمولاسیون‌های RPMI-1640، ترکیباتی مانند L-Glutamine، HEPES، Sodium Pyruvate و Phenol Red وجود دارند. برخی محصولات نیز بدون یک یا چند مورد از این ترکیبات عرضه می‌شوند.
برای نمونه، یکی از فرمولاسیون‌های ATCC شامل 2 mM L-Glutamine، 10 mM HEPES، 1 mM Sodium Pyruvate، 4500 mg/L Glucose و 1500 mg/L Sodium Bicarbonate است؛ اما این مشخصات نباید بدون تأیید، به محصول هیربد نسبت داده شود.
کاربردهای RPMI-1640
محیط کشت RPMI-1640 در طیف گسترده‌ای از تحقیقات سلولی استفاده می‌شود، از جمله:
- کشت سلول‌های پستانداران
- کشت سلول‌های لنفوئیدی
- تحقیقات ایمونولوژی
- تحقیقات سرطان
- مطالعات زیست‌شناسی سلولی
- آزمایش‌های مربوط به سلول‌های خونی
- آماده‌سازی و نگهداری برخی رده‌های سلولی
- مطالعات رشد و زنده‌مانی سلول‌ها
- تحقیقات بیوتکنولوژی و زیست‌پزشکی
از رده‌ها و سلول‌هایی که در منابع تولیدکنندگان برای انواع RPMI-1640 ذکر شده‌اند می‌توان به Jurkat، HeLa، MCF-7، PC12 و PBMC اشاره کرد؛ با این حال انتخاب محیط مناسب باید بر اساس رده سلولی و پروتکل آزمایش انجام شود.
RPMI-1640 برای چه سلول‌هایی مناسب است؟
RPMI-1640 به‌طور گسترده برای برخی سلول‌های سیستم ایمنی و لنفوئیدی و همچنین تعدادی از رده‌های سلولی پستانداران استفاده می‌شود.
برای مثال، منابع معتبر کاربرد آن را برای سلول‌هایی مانند Jurkat، PBMC، HeLa و MCF-7 گزارش کرده‌اند. با این حال، مناسب بودن یک فرمولاسیون مشخص برای یک رده سلولی به شرایط کشت، افزودنی‌ها و دستورالعمل همان رده بستگی دارد.
بنابراین بهتر است پیش از استفاده، دستورالعمل کشت سلول موردنظر و مشخصات فنی نسخه RPMI-1640 خریداری‌شده بررسی شود.
نقش L-Glutamine در RPMI-1640
L-Glutamine یکی از ترکیبات مهم در بسیاری از فرمولاسیون‌های محیط‌های کشت سلولی است و در متابولیسم سلول نقش دارد.
نکته مهم این است که تمام محصولات تجاری با عنوان RPMI-1640 الزاماً فرمول یکسانی ندارند. برخی نسخه‌ها حاوی L-Glutamine هستند و برخی محصولات به‌صورت فاقد آن عرضه می‌شوند. بنابراین وجود یا مقدار L-Glutamine در محصول هیربد باید بر اساس برچسب، دیتاشیت یا Certificate of Analysis محصول مشخص شود.
نقش FBS در محیط RPMI-1640
RPMI-1640 پایه، تمام عوامل مورد نیاز برای رشد همه رده‌های سلولی را به‌تنهایی تأمین نمی‌کند.
به همین دلیل در بسیاری از پروتکل‌های کشت سلولی، محیط RPMI-1640 با Fetal Bovine Serum (FBS) یا سایر مکمل‌های مورد نیاز سلول ترکیب می‌شود. مقدار و نوع مکمل باید بر اساس رده سلولی و پروتکل آزمایش تعیین شود.
RPMI-1640 و CO₂
بسیاری از فرمولاسیون‌های RPMI-1640 از سیستم بافری Sodium Bicarbonate/CO₂ برای کنترل pH استفاده می‌کنند.
درصد مناسب CO₂ به فرمولاسیون و مقدار Sodium Bicarbonate محصول بستگی دارد. برای مثال، یک فرمولاسیون ATCC با 1.5 g/L Sodium Bicarbonate برای استفاده در 5% CO₂ مشخص شده است، در حالی که برخی فرمولاسیون‌های تجاری دیگر شرایط متفاوتی دارند.
بنابراین نباید یک درصد ثابت CO₂ را برای تمام محصولات RPMI-1640 در سایت درج کرد.
تفاوت RPMI-1640 و DMEM
هر دو RPMI-1640 و DMEM از محیط‌های رایج کشت سلول‌های پستانداران هستند، اما ترکیب و کاربردهای رایج آن‌ها یکسان نیست.
RPMI-1640 به‌طور تاریخی برای کشت سلول‌های خونی و لنفوئیدی توسعه یافته و امروزه برای طیف وسیعی از سلول‌های پستانداران استفاده می‌شود. DMEM نیز فرمولاسیون متفاوتی دارد و انتخاب میان این دو باید بر اساس نوع سلول، پروتکل آزمایش و نیازهای تغذیه‌ای سلول انجام شود.
هنگام خرید RPMI-1640 چه مشخصاتی را بررسی کنیم؟
پیش از خرید محیط کشت RPMI-1640، فقط نام محصول را بررسی نکنید. تفاوت میان فرمولاسیون‌ها می‌تواند برای نتیجه آزمایش اهمیت داشته باشد.
موارد زیر را بررسی کنید:
- نوع فرمولاسیون
- وجود یا عدم وجود L-Glutamine
- وجود یا عدم وجود HEPES
- وجود یا عدم وجود Phenol Red
- وجود یا عدم وجود Sodium Pyruvate
- مقدار Glucose
- مقدار Sodium Bicarbonate
- شکل محصول؛ پودر یا محلول آماده
- استریل بودن محصول
- حجم بسته‌بندی
- شرایط نگهداری
- تاریخ تولید و انقضا
- اطلاعات QC و در صورت نیاز Certificate of Analysis
- سازگاری فرمولاسیون با رده سلولی مورد استفاده
این موضوع اهمیت دارد، زیرا حتی محصولات مختلف با نام RPMI-1640 می‌توانند از نظر افزودنی‌ها و ترکیبات با یکدیگر تفاوت داشته باشند.
نگهداری RPMI-1640
شرایط نگهداری به فرمولاسیون و دستورالعمل تولیدکننده بستگی دارد.
برای نمونه، ATCC برای یکی از فرمولاسیون‌های RPMI-1640 نگهداری در 2 تا 8 درجه سانتی‌گراد و دور از نور را توصیه می‌کند.
برای محصول موجود در هیربد شیمی آریا، دمای دقیق نگهداری، مدت ماندگاری و شرایط پس از باز شدن بسته باید بر اساس اطلاعات درج‌شده روی محصول یا دیتاشیت آن اعلام شود.
خرید و استعلام قیمت RPMI-1640
برای خرید RPMI-1640، بهتر است پیش از استعلام قیمت، مشخصات مورد نیاز خود را مشخص کنید؛ از جمله نوع فرمولاسیون، حجم، شکل محصول و نیاز به ترکیباتی مانند L-Glutamine یا HEPES.
قیمت محیط کشت RPMI-1640 نیز می‌تواند با توجه به برند، فرمولاسیون، حجم بسته‌بندی و مشخصات کیفی متفاوت باشد.
برای اطلاع از قیمت، موجودی، حجم و مشخصات دقیق محصول RPMI-1640 می‌توانید با کارشناسان هیربد شیمی آریا تماس بگیرید.
جمع‌بندی
RPMI-1640 یک محیط کشت چندجزئی پرکاربرد برای کشت سلول‌های پستانداران است که در تحقیقات سلولی، ایمونولوژی، سرطان و بیوتکنولوژی استفاده می‌شود.
از آنجا که فرمولاسیون محصولات مختلف RPMI-1640 می‌تواند متفاوت باشد، هنگام خرید باید علاوه بر نام محصول، ترکیبات، افزودنی‌ها، شکل محصول، شرایط نگهداری و مشخصات کیفی آن بررسی شود.
برای استعلام قیمت و مشخصات دقیق RPMI-1640 می‌توانید با کارشناسان هیربد شیمی آریا در ارتباط باشید.
نقد و بررسی‌ها
هنوز بررسی‌ای ثبت نشده است.